灌注法去细胞技术构建食管全层细胞外基质的实验研究

作者：侯楠; 朱力; 马瑞娜; 杨松

来源：成都医学院学报, 2016, 11(03): 321-386.

• 灌注法
• 食管
• 组织工程
• 细胞外基质

目的利用灌注法去细胞技术构建食管全层去细胞外基质,为组织工程食管重建选择1种理想的支架材料。方法成年新西兰大白兔(雌雄不限)24只,随机分为灌注组(n=16)和正常对照组(n=8),采用灌注法去细胞技术处理兔食管,处理后的标本均行大体、组织学、扫描电镜、免疫荧光R染色检测及MTT细胞毒性试验。结果大体观察:离体食管经灌注2h后可见大部分变白,经16h灌注后食管变得苍白剔透,清楚可见脉管纹理。组织学与扫描电镜观察:灌注法构建的食管全层去细胞外基质的去细胞程度均匀,孔隙多,孔隙率为(88.25±2.37)%。免疫荧光染色:离体食管MHC-I和MHC-II染色呈阳性表达,灌注法构建的食管全层去细胞外基质MHC-I和MHC-II染色呈阴性表达。MTT细胞毒性试验:含食管外基质浸提液培养的骨髓间充质干细胞与普通细胞培养液培养的骨髓间充质干细胞相比较,细胞相对增殖率>1。结论采用灌注法构建食管全层去细胞外基质可操作性强,安全性好,免疫原性极低,且食管全层去细胞外基质对细胞无毒性,有一定的促生长作用,是组织工程食管重建的理想支架材料。

• 单位
  第四军医大学; 成都医学院第一附属医院; 唐都医院