宽体沙鳅(Botia reevesae)热休克蛋白70基因的克隆及表达分析

作者：覃川杰; 顾顺樟; 赵大显; 陈立侨; 李二超; 齐**

来源：海洋与湖沼, 2013, 44(06): 1584-1591.

• 宽体沙鳅
• 热休克蛋白70
• 氨氮
• 嗜水气单胞菌
• 胁迫

为深入分析热休克蛋白响应胁迫的分子机制,实验以宽体沙鳅(Botia reevesae)为研究对象,利用同源克隆和cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆得到宽体沙鳅热休克蛋白70(heat shock protein,BR-HSP70)的cDNA全长。结果发现,BR-HSP70 cDNA全长为2371bp,包含1947bp的开放阅读框(opening reading frame,ORF),102bp 5′-非编码区(untranslated region,UTR)和322bp 3′-UTR等。通过序列同源性比对发现,BR-HSP70 cDNA与团头鲂(Megalobrama amblycephala)和猪(Sus scrofa)的同源性分别为98%及83%,且ORF编码的649个氨基酸中含有HSP70家族的家族信号标签、N-糖基化位点及EEVD等保守区域。结果表明,克隆的cDNA为宽体沙鳅HSP70基因。实时荧光定量PCR分析发现,氨氮胁迫和嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)侵染均会显著上调宽体沙鳅鳃、肝脏及肾脏HSP70 mRNA的表达(P<0.05),表明HSP70基因在宽体沙鳅应对环境胁迫中发挥了重要的抗应激作用。

• 单位
  内江师范学院; 华东师范大学; 南昌大学生命科学与食品工程学院; 生命科学学院