黄芪甲苷通过调控Keap1-Nrf2-ARE信号通路减轻PM2.5诱导的肾小管上皮细胞氧化损伤

作者：赵颖丹; 张天嵩; 马骏^*; 张伟伟; 易扬; 顾波; 王汉清; 宣怡

来源：安徽中医药大学学报, 2020, 39(02): 69-75.

• 黄芪甲苷
• 肾小管上皮细胞
• 氧化损伤
• PM2.5
• Keap1
• Nrf2
• ARE
• 信号通路

目的探讨黄芪甲苷减轻细颗粒物2.5(particulate matter 2.5,PM2.5)所致肾小管上皮细胞氧化损伤的作用及分子机制。方法将HK-2细胞分为5组:对照组(仅磷酸盐缓冲液处理)、模型组(200μg/mL PM2.5处理24h)、黄芪甲苷低剂量组(200μg/mL PM2.5及10nmol/L黄芪甲苷共同处理24h)、黄芪甲苷中剂量组(200μg/mL PM2.5及100nmol/L黄芪甲苷共同处理24h)、黄芪甲苷高剂量组(200μg/mL PM2.5及200nmol/L黄芪甲苷共同处理24h)。采用流式细胞术和TUNEL检测不同方法处理的HK-2细胞凋亡情况,采用EdU实验和CCK8实验检测细胞增殖情况,采用Western blot检测不同方法处理的HK-2细胞中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)-核因子红细胞相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)-抗氧化反应元件(antioxident response element,ARE)信号通路相关蛋白的表达水平。结果流式细胞术和TUNEL染色结果显示,黄芪甲苷显著抑制PM2.5导致的肾小管上皮细胞凋亡,其抑制效果随黄芪甲苷浓度的增加而增加。CCK8检测结果和EdU细胞增殖检测结果显示,黄芪甲苷显著促进肾小管上皮细胞增殖,细胞活力随黄芪甲苷浓度的增加而增加。进一步检测显示,黄芪甲苷显著抑制PM2.5导致的肾小管上皮细胞活性氧和丙二醛水平升高,并显著促进超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平的升高。Western blot结果显示,与模型组比较,黄芪甲苷处理显著提高总Nrf2、核Nrf2、血红素氧化酶-1以及NAD(P)H醌脱氢酶1(NQO1)水平(P<0.05)。结论黄芪甲苷通过调控Keap1-Nrf2-ARE信号通路减轻PM2.5导致的肾小管上皮细胞氧化损伤。

• 单位
  上海市静安区中心医院; 复旦大学附属华山医院