山羊痘病毒毒力因子KLP1互作蛋白的筛选与初步鉴定

作者：高娜; 童剑军; 何川川; 张雪萍; 杨勇飞; 李有文^*

来源：中国兽医学报, 2021, 41(05): 900-910.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.05.11

• 山羊痘病毒
• 羊皮肤酵母cDNA文库
• 酵母双杂交
• KLP1蛋白
• 互作蛋白

为进一步研究山羊痘病毒毒力因子KLP1,了解其生物学功能,本试验构建了羊皮肤组织酵母cDNA文库及GTPV KLP1蛋白基因的诱饵质粒,并做了质粒的自激活检测。采用酵母双杂交方法,从羊皮肤组织酵母cDNA文库中筛选出与KLP1蛋白相互作用的蛋白,结果成功构建了羊皮肤组织cDNA文库,容量为1.05×107 CFU,成功构建pGBKT7-KLP1诱饵质粒,且在酵母双杂交系统中没有毒性和自激活作用;酵母双杂交筛选出与KLP1蛋白互作的蛋白克隆25个,经过测序比对合并得9种蛋白,对其进行LacZ回转验证和共定位试验验证,证实NOTCH1蛋白与KLP1蛋白具有特异的相互作用。本试验为阐明GTPV毒力因子KLP1的生物学特征及其作用机制提供参考。

• 单位
  新疆生产建设兵团; 生命科学学院; 塔里木大学; 动物科学学院