摘要

目的:构建髓系细胞触发受体-1(TREM-1)的真核表达质粒。方法:利用RT-PCR从人外周血总RNA中扩增TREM-1基因的全长cDNA,插入克隆载体pUCm-T,BamHI和Pst I,酶切后将目的片段插入真核表达载体pEGFP-C3,构建含有TREM-1的重组质粒pEGFP-TREM-1,转染293细胞,用荧光显微镜观察、Western-blot鉴定蛋白表达。将pEGFP-TREM-1重组质粒转染THP-1细胞,100 ng/ml LPS刺激24 h后,半定量RT-PCR检测TNF-α和IL-1β基因的mRNA水平。结果:经酶切和基因测序证实,克隆的基因片段为TREM-1基因;经转染的2...

  • 单位
    浙江大学医学院附属第一医院; 传染病诊治国家重点实验室

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