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摘要
[目的]应用生物学软件与单克隆抗体技术相结合的方法鉴定PEDV S2基因B细胞表位肽。[方法]利用CLC Sequence viewer 6.8软件及在线数据库IEDB筛选出PEDV S2基因B细胞表位，并人工合成表位肽。将表位肽与钥孔血蓝蛋白（KLH）耦联后作为抗原，免疫雌性BALB/c小鼠，通过ELISA法筛选出抗体效价较高的小鼠进行1次加强免疫，3 d后取脾脏制备脾细胞悬液进行细胞融合。经HAT选择培养基培养筛选有效杂交瘤细胞，采用ELISA法筛选阳性克隆继续进行扩大培养。将部分阳性杂交瘤细胞进行小鼠腹腔注射，并收集腹水。通过ELISA方法分别检测小鼠腹水和单克隆细胞株培养上清液抗体效价，确定最高效价作为后备细胞株。[结果]筛选出B细胞表位肽序列为：MQYVYTPTYYML；免疫多肽抗原后融合前血清抗体效价达到1∶2 000;BALB/c小鼠腹水及单克隆细胞株培养物上清液ELISA检测结果显示抗体效价达到1∶4 000。[结论]筛选出了PEDV S2基因B细胞表位，为PEDV表位肽疫苗载体构建研究提供参考。
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