miR-1-3p调控ANXA2表达对高糖诱导的视网膜微血管内皮细胞新生血管生成的影响

作者：巨朝娟; 许寅聪; 李康宁; 石笑楠^*; 熊朝晖; 戴明明

来源：眼科新进展, 2023, 43(12): 952-957.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2023.0189

• 微小RNA-1-3p
• 膜联蛋白A2
• 高糖
• 视网膜微血管内皮细胞
• 新生血管
• 细胞增殖
• 细胞迁移

目的 探讨微小RNA-1-3p(miR-1-3p)/膜联蛋白A2(ANXA2)分子轴在高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)新生血管生成过程中的作用机制。方法 体外培养HRMECs并采用高糖(HG)处理细胞建立细胞损伤模型。HRMECs分组处理：Con组(含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养)、HG组(25 mmol·L-1 D-葡萄糖培养)、HG+miR-NC组(转染miR-NC)、HG+miR-1-3p组(转染miR-1-3p mimics)、HG+sh-NC组(转染sh-NC)、HG+sh-ANXA2组(转染sh-ANXA2)、HG+miR-1-3p+pcDNA组(转染miR-1-3p mimics+pcDNA)、HG+miR-1-3p+pcDNA-ANXA2组(转染miR-1-3p mimics+pcDNA-ANXA2)。转染48 h后收集细胞，采用25 mmol·L-1的D-葡萄糖培养基培养HRMECs 24 h。采用MTT、Transwell小室实验分别检测细胞活力、迁移细胞数。管腔形成实验检测管腔形成数。双荧光素酶报告实验检测miR-1-3p与ANXA2的靶向关系。Western blot检测VEGF、MMP-2蛋白水平。结果 与Con组比较，HG组miR-1-3p表达水平降低，ANXA2 mRNA及蛋白水平均升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与Con组比较，HG组细胞活力升高，迁移细胞数、管腔形成数增多，VEGF、MMP-2蛋白水平升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与HG+miR-NC组比较，HG+miR-1-3p组细胞活力降低，迁移细胞数、管腔形成数减少，VEGF、MMP-2蛋白水平降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与HG+sh-NC组比较，HG+sh-ANXA2组细胞活力降低，迁移细胞数、管腔形成数减少，VEGF、MMP-2蛋白水平降低，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与HG+miR-1-3p+pcDNA组比较，HG+miR-1-3p+pcDNA-ANXA2组细胞活力升高，迁移细胞数、管腔形成数增多，VEGF、MMP-2蛋白水平升高，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 miR-1-3p过表达可通过靶向调控ANXA2表达抑制HRMECs的增殖、迁移及新生血管生成。

• 单位
  河北医科大学第一医院