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摘要
本研究克隆BjuDDF1的蛋白编码序列并分析了BjuDDF1的亚细胞定位情况，并在NaCl、ABA和低温胁迫处理下分析了BjuDDF1的表达模式，为深入探究BjuDDF1的基因功能和抗逆分子机制提供研究依据。本研究提取茎瘤芥幼苗RNA，反转录cDNA，以cDNA作为模板，采用PCR技术对BjuDDF1的CDS序列进行克隆，采用无缝克隆技术将目的载体35S::PTF101-GFP与BjuDDF1的CDS序列进行连接；利用生物信息学、荧光定量PCR和烟草叶片瞬时转化技术，对BjuDDF1的基因和蛋白序列及结构、逆境胁迫下的基因表达模式及BjuDDF1的亚细胞定位情况进行分析。研究结果表明，BjuDDF1与DDF1(AT1G12610)的基因同源性可达73%，并且两者的蛋白序列高度相似，均能编码一种AP2型转录因子；在50 μmol/L ABA处理3小时后，BjuDDF1的表达显著受ABA诱导表达，而在NaCl和低温胁迫处理下，BjuDDF1的表达与对照组没有显著性差异，表明BjuDDF1可能参与调控榨菜对于ABA的响应；在烟草细胞的细胞核中能清晰地检测到BjuDDF1-GFP融合蛋白信号，表明BjuDDF1编码蛋白在细胞核中发挥生物学功能。本研究结果将为进一步研究BjuDDF1的生物学功能和培育耐逆稳产的茎瘤芥新品种提供科学参考。
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单位长江师范学院
