苍膝通痹胶囊调控circRNA＿0008365/miR-1271/p38 MAPK通路轴促进膝骨关节炎软骨细胞自噬的机制研究

作者：谢文鹏; 马腾; 梁延琛; 王象鹏; 毕荣修; 王卫国; 张永奎^*

来源：中国中药杂志, 2023, 48(18): 4843-4851.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20230510.708

• 苍膝通痹胶囊
• circRNA＿0008365
• miR-1271
• p38 MAPK通路
• 自噬
• 膝骨关节炎

该研究旨在探讨苍膝通痹胶囊通过调控circRNA＿0008365/miR-1271/p38 MAPK通路轴促进软骨细胞自噬抑制膝骨关节炎(KOA)进展的机制。于体内、体外分别构建软骨细胞和大鼠的骨关节炎模型，分别给予苍膝通痹胶囊、circRNA＿0008365干扰、空载对照、以及苍膝通痹胶囊合用circRNA＿0008365干扰进行干预。应用流式细胞术观察细胞凋亡，透射电镜观察自噬小体，Western blot观察各组软骨细胞自噬指标微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)Ⅱ/Ⅰ、自噬效应蛋白-1(Beclin-1)、选择性自噬接头蛋白p62/sequestosome 1(selective autophagy junction protein p62/sequestosome 1,p62)、软骨细胞外基质代谢(collagenⅡ、ADAMTS-5)及p-p38 MAPK的蛋白表达，qRT-PCR观察各组软骨细胞circRNA＿0008365、miR-1271、collagenⅡ、ADAMTS-5的表达水平，hematoxylin-eosin(HE)染色观察各组大鼠膝关节软骨组织形态学的改变，ELISA观察各组软骨细胞炎性因子(IL-1β、TNF-α)的表达变化。体外实验结果显示，IL-1β诱导的软骨细胞circRNA＿0008365表达量下降，miR-1271、p38 MAPK表达量上升，自噬水平下降而凋亡率上升，软骨外基质的分解代谢增加；苍膝通痹胶囊的干预使KOA软骨细胞的circRNA＿0008365表达量回升，miR-1271、p38 MAPK表达量下降，自噬水平升高而凋亡率降低，软骨外基质的分解代谢减弱；而干扰circRNA＿0008365后，抑制了苍膝通痹胶囊的干预趋势。体内实验提示，苍膝通痹胶囊剂量依赖性的抑制了p38 MAPK通路的表达，增强了软骨细胞自噬，降低了KOA大鼠关节软骨的损害和炎症反应，从而抑制了KOA的进展。该研究表明，苍膝通痹胶囊能通过调控circRNA＿0008365/miR-1271/p38 MAPK通路轴促进软骨细胞自噬，抑制KOA的发展。

• 单位
  山东中医药大学附属医院; 山东中医药大学