兔肝细胞体外分离及培养方法的实验研究

作者：罗文; 周晓东; 巩萧音; 贺建国; 王莉; 秦海英

来源：现代生物医学进展, 2006, (10): 5-7.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2006.10.003

• 兔
• 肝细胞
• 分离
• 培养

目的：研究体外兔肝细胞分离及培养方法,比较不同培养基条件下兔肝细胞培养过程。方法：采用非灌注胶原酶消化法分离兔肝细胞,分别采用RPIM 1640培养液(含10％新生牛血清),DMEM培养液(含10％新生牛血清),DMEM培养液(含10％胎牛血清)培养,计数法观察原代细胞增殖变化,MTT法观察传代细胞增殖情况。培养细胞采用PAS染色法鉴定,电镜观察细胞超微结构。结果：分离的肝细胞细胞活率大于85％；DMEM培养液(含10％胎牛血清)培养肝细胞生长状态较另两种培养液中的肝细胞强,DMEM培养液(含10％新生牛血清)中的细胞增殖能力较RPIM 1640培养液(含10％新生牛血清)高．具有统计学意义。PAS染色和透射电镜观察培养细胞胞质中有大量糖原颗粒。结论：本实验采用的分离方法可获得较纯的肝细胞,而且操作简便实用。DMEM培养液较RPIM 1640培养液更加适宜原代培养肝细胞生长,胎牛血清对培养肝细胞的生长促进作用明显高于新生牛血清。

• 单位
  第四军医大学; 西京医院