儿童急性呼吸道感染中腺病毒环介导等温扩增技术检测方法的建立

作者：李凡; 赵林清; 邓洁; 朱汝南; 孙宇; 刘立颖; 李玉运; 钱渊

来源：中华儿科杂志, 2013, (01): 52-57.

• 腺病毒,人
• 呼吸道感染
• 儿童
• 环介导等温扩增技术

目的利用环介导等温扩增技术(LAMP),建立一种快速可靠的儿童急性呼吸道感染标本中腺病毒检测方法。方法根据腺病毒六邻体基因序列设计特异性LAMP引物,使用实时浊度仪对所建立的LAMP方法进行特异性与灵敏度评估后,对3、7、14型腺病毒分离株共11株进行了检测,随后对经直接免疫荧光法(DFA)鉴定为腺病毒阳性的呼吸道标本36例、腺病毒阴性的呼吸道标本72例分别应用巢式多重PCR和LAMP两种方法进行检测。结果所建立的LAMP方法最低检岀腺病毒DNA浓度为1.9×10~2拷贝/ml;方法特异性好,与其他病毒间无交叉反应;11株腺病毒分离株应用LAMP方法检测全部为阳性;36例已经过DFA鉴定为腺病毒阳性的标本中,应用LAMP法共检岀腺病毒DNA阳性34例;72例DFA鉴定为腺病毒阴性的标本应用LAMP方法检测5例阳性。本研究建立的LAMP方法与DFA的总符合率为93.5%;与巢式多重PCR的总符合率为98.1%。结论本研究建立的LAMP方法耗时短、灵敏度好、特异性高、操作简便,适用于儿童呼吸道标本中腺病毒的实验室快速检测,具有较好的实际应用前景。

• 单位
  北京大学; 首都儿科研究所