A型塞内卡病毒VP1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

作者:秦文珍; 李挺; 赵欣; 董苏洁; 翟焕杰; 叶晨倩; 叶曼青; 童武; 郑浩; 于海; 单同领; 童光志; 兰道亮; 孔宁
来源:中国动物传染病学报, 2022, 1-7.
DOI:10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20220128.005

摘要

A型塞内卡病毒(SVA)是一种新兴的猪病原体,可引起母猪水泡样病变和仔猪急性死亡。本研究将SVA的VP1基因分别克隆到原核表达载体pCold-I和pCold-TF,并将测序正确的重组质粒VP1-pCold-I、VP1-pCold-TF转化BL21(DE3)大肠杆菌中,诱导表达重组蛋白。结果显示:VP1-pCold-I表达的目的蛋白在沉淀(包涵体)中,VP1-pCold-TF表达的蛋白为可溶性蛋白。分别纯化上述表达的蛋白,并免疫BALB/c小鼠,经四次免疫后得到多克隆抗体。经Western-blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定,制备的多克隆抗体具有良好的Western-blot效价和IFA效价,为相关基础研究和应用研究提供了工具。

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