核磁共振氢谱法对3种低相对分子质量肝素中残留溶剂乙醇的定性和定量分析

作者：李馨白; 徐翊雯; 张雅军; 孙会敏^*; 吴先富^*

来源：中国药学杂志, 2023, 58(08): 725-729.

• 定量核磁共振氢谱法
• 残留溶剂
• 乙醇
• 低相对分子质量肝素
• 达肝素钠
• 那屈肝素钙
• 依诺肝素钠

目的 建立测定达肝素钠、依诺肝素钠、那屈肝素钙3种低相对分子质量肝素中残留溶剂乙醇含量的定量核磁共振氢谱法(quantitative proton nuclear magnetic resonance, qHNMR)。方法 采用Bruker AVANCE NEO 600 MHz核磁共振波谱仪，采集3种低相对分子质量肝素的核磁共振氢谱(1H-NMR),以2,2,3,3-d4-3-(三甲基硅基)丙酸钠盐(TSP-d4)作为内标物，重水(D2O)为溶剂，90°脉冲，采样次数(NS)为32次，测试温度25℃采样时间(AQ)为4.59 s,弛豫延迟时间(D1)为40 s,对3种低相对分子质量肝素中的残留溶剂乙醇进行定性和定量分析。结果 样品的1H-NMR谱在化学位移δ 1.18和δ 3.65分别出现甲基和亚甲基质子信号，结合耦合常数可以确定样品中含有残留溶剂乙醇。同时，乙醇和TSP-d4定量峰信号在1H-NMR谱上分离度良好，乙醇在线性范围内线性关系良好(r>0.999 9),方法精密度和重复性良好，平均回收率(n=9)为101.55%,3种低相对分子质量肝素中的乙醇含量为0.025%～0.493%,测定结果与顶空气相色谱法测定结果基本一致。结论 建立的qHNMR方法可以准确识别低相对分子质量肝素样品中是否含有乙醇，同时可以对其进行准确定量，相比于经典的气相色谱方法更加简便快速，并且不破坏样品，拓宽了残留溶剂的检测手段，可为不同低相对分子质量肝素产品中残留溶剂乙醇测定提供参考。

• 单位
  中国食品药品检定研究院