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摘要
细胞穿膜肽由于存在靶细胞摄取效率低等问题,使其在药物递送载体领域的应用受到限制。本研究用基因工程手段将穿膜肽M918与靶向HER2的单链抗体偶联,通过大肠杆菌表达系统和镍亲和层析表达并纯化了重组蛋白M918-scFv。利用微量热泳动技术检测重组蛋白M918-scFv与HER2抗原的亲和能力;利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测重组蛋白的内吞效率。实验结果表明亲和层析获得的重组蛋白M918-scFv纯度较高,偶联M918,不会改变scFv与抗原的亲和能力。在HER2阳性细胞中,重组蛋白M918-scFv的内吞效率是scFv的1.8倍,说明重组蛋白M918-scFv发挥了穿膜肽M918的穿膜特性,表现出更高的内吞效率。穿膜肽M918偶联scFv既表现出穿膜肽的穿膜特性又兼具了scFv的靶向性,提供了一种新的靶向递送的策略。
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