重组Akt腺病毒的构建及其在肝硬化大鼠肝脏中的表达

作者：邓刚; 黄飞舟; 刘浔阳; 罗成群; 郭立武

来源：中国普通外科杂志, 2008, (07): 687-691.

• 肝硬化
• 重组腺病毒载体
• Akt
• 转染
• 基因表达 Liver Cirrhosis
• Recombinant Adenovirus Vector
• Akt
• Transfection
• Gene Expression

目的探讨持续活化Akt且带有HA标签(myr-HA-Akt)基因的重组腺病毒在肝硬化大鼠肝脏中的表达特性。方法酶切正向插入目的基因的真核表达载体pcDNA3.1-myr-HA-Akt,获得myr-HA-Akt cDNA后,将其定向克隆到穿梭质粒pDC316中,然后将重组质粒与病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染293细胞,获得复制缺陷型重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt,并进行扩增、纯化。通过观察腺病毒感染293细胞后是否出现细胞病变效应;PCR和基因测序方法对所构建病毒进行鉴定,并采用TCID50法检测病毒滴度。自尾静脉注射重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt感染肝硬化模型大鼠...

• 单位
  中南大学湘雅三医院