抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b多克隆抗体的制备和鉴定

作者：刘嘉; 丁红晖; 杨燕; 胡斌; 余源; 黄红平; 陆蒙吉; 杨东亮

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2009, (10): 917-919.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005243

• 去唾液酸糖蛋白受体
• 多克隆抗体
• 剪接异构体

目的:制备小鼠抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b的多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法:合成H1b特异性多肽,以匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏小鼠,制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体;ELISA法检测抗体效价,通过Western blot和免疫组织化学检测,鉴定抗体的特异性与适用范围。结果:得到小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体,效价达1∶105。纯化后的抗体用于Western blot可高特异性识别真核表达的H1b蛋白,并可用于免疫组织化学实验。结论:成功制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体,该抗体具有较高的效价以及特异性,能区分ASG-PR大亚基的两种剪接异构体,从而为进一步研究H1b蛋白的生理功能及其在人类疾病中的意义提供了有利工具。

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院