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摘要
目的用新型玻璃化冷冻方法冻融人卵巢组织,在体外培养该组织时添加angiogenin,观察其对微血管生成的影响,并将培养后的组织进行异种移植,观察两周后移植物的血循环情况。方法收集人卵巢组织并用NIV法进行冻融,通过免疫组化染色比较冻融前后组织中angiogenin的表达情况,将冻融的卵巢组织放在angiogenin浓度分别为0,100,200及400ng/ml的培养液中培养7天,取出组织进行CD34免疫组化染色,计数并比较不同angiogenin浓度组卵巢组织微血管密度差异,确定较适宜的培养浓度后,在适宜浓度下培养冻融人卵巢组织0,2,5,7天,观察不同培养时间组卵巢组织的微循环重建效果,将体外培养后的卵巢组织移植到SCID小鼠皮下,一周后取出移植物,观察微血管密度变化及细胞凋亡情况。结果冻融后卵巢组织间质中的angiogenin表达量下降,卵巢组织在angiogenin浓度为200ng/ml的培养液中生长的卵巢组织微血管密度最高。添加angiogenin后培养5天的卵巢组织微血管密度较培养2天及培养7天组高。卵巢组织短期培养后移植至SCID小鼠皮下一周,与对照组比较,添加angiogenin 200ng/ml培养后的卵巢移植物微血管密度增高,间质细胞凋亡减少。结论 angiogenin可促进冻融人卵巢组织微循环重建,可为女性的生育能力保存提供有力的支持。
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单位四川大学华西第二医院
