miR-154-3p靶向Smad7对人脐静脉内皮细胞生长、运动及免疫的影响

作者：袁晓丽; 江莉; 黄莉莉^*; 胡斌

来源：广东药学院学报, 2021, 37(03): 123-129.

DOI：10.16809/j.cnki.2096-3653.2021030903

• 人脐静脉内皮细胞
• miR-154-3p
• Smad同源物7
• 细胞侵袭

目的探究miR-154-3p通过靶向Smad7对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的生长、运动及免疫的影响。方法体外培养HUVEC,将HUVEC转染miR-154-3p mimic后采用RT-PCR检测miR-154-3p和Smad7的mRNA表达水平,采用生物学信息预测结合荧光素酶实验确定miR-154-3p和Smad7的靶向关系;HUVEC单独转染miR-154p、Smad7,采用Western-blot检测Smad7蛋白的表达情况,采用克隆形成检测细胞生长情况;采用Transwell实验检测细胞侵袭情况;采用微管形成实验结合蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子C(VEGFC)表达情况;采用酶联免疫吸附试验结合RT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-4(IL-4)水平。结果荧光素酶实验发现,miR-154-3p上存在Smad7的结合位点。相比Control组,miR-154-3p组miR-154-3p、IL-10 mRNA和血清IL-10含量水平显著升高(P>0.05),Smad7蛋白、克隆形成率、单位面积细胞侵袭数、VEGF蛋白、微管形成节点数、iNOS mRNA、血清iNOS含量、IL-6 mRNA和血清IL-6含量水平显著降低(P>0.05);相比Control组,Smad7组miR-154-3p组miR-154-3p、IL-10 mRNA和血清IL-10含量水平显著降低(P>0.05),Smad7蛋白、克隆形成率、单位面积细胞侵袭数、VEGF蛋白、微管形成节点数、iNOS mRNA、血清iNOS含量、IL-6 mRNA和血清IL-6含量水平显著升高(P>0.05)。相比Smad7组,miR-154-3p+Smad7组miR-154-3p、IL-10 mRNA和血清IL-10含量水平显著升高(P>0.05),Smad7蛋白、克隆形成率、单位面积细胞侵袭数、VEGF蛋白、微管形成节点数、iNOS mRNA、血清iNOS含量、IL-6 mRNA和血清IL-6含量水平显著降低(P>0.05)。结论miR-154-3p过表达可以靶向下调Smad7表达,有效抑制HUVEC的增殖和运动能力。

• 单位
  绵阳市中心医院; 西南医科大学