ACTD的CM对旁观者V79细胞Δψm和胞质内细胞色素C的影响

作者：靳翠红; 巫生文; 刘秋芳; 蔡原

来源：工业卫生与职业病, 2014, 40(01): 18-20.

DOI：10.13692/j.cnki.gywsyzyb.2014.01.005

• 放线菌素D
• 条件培养液
• 线粒体膜电位
• 细胞色素C

目的观察放线菌素D(actinomycin D,ACTD)处理中国仓鼠成纤维靶细胞(the Chinese hamster fibroblast V79-C3cell line,V79细胞)获得的条件培养液(conditioned medium,CM)对V79旁观者细胞线粒体膜电位(Δψm)和胞质内细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)含量的影响,以研究ACTD诱导旁观者效应发生的可能机制。方法用4.0mg/L ACTD处理V79靶细胞1h,磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)漂洗3次,加入新鲜培养液开始计时,分别在第4、8、12和24h获取靶细胞条件培养液CM。不同时段CM培养正常V79细胞24h后,采用罗丹明123(Rhodamine 123,Rh123)荧光染色流式细胞仪法检测旁观者细胞的线粒体膜电位(Δψm);比色法测定胞质内Cyt C的含量。结果各CM处理组旁观者细胞Δψm均比对照组下降(P<0.01)。随着时段的延后,Δψm平均荧光强度在逐渐增加,24h又减少(P<0.01)。胞质内Cyt C含量以对照组最低,CM处理组胞质内Cyt C含量增加(P<0.01),4h最高,随后下降,24h又明显增加(P<0.01)。结论 ACTD诱导旁观者效应可能通过靶细胞的CM影响旁观者细胞线粒体膜电位下降和胞质内Cyt C含量增加,进而引起旁观者细胞凋亡。

• 单位
  公共卫生学院; 中国医科大学