3-甲基腺嘌呤对支气管哮喘小鼠气道炎症及气道高反应和黏液分泌的影响

作者：冉琴; 张雷; 邱玉环; 王星; 李国平^*

来源：中华结核和呼吸杂志, 2019, (03): 185-192.

• 哮喘
• 自噬
• 内质网
• 3-甲基腺嘌呤

目的 探讨3-甲基腺嘌呤对支气管哮喘(哮喘)小鼠气道炎症、气道高反应和黏液分泌的影响及其作用机制。方法 采用随机数字表法将24只C57BL/6J雌性小鼠随机分为健康对照组(PBS组)、哮喘组(OVA组)、哮喘+3-甲基腺嘌呤组(OVA+3-MA组)、哮喘+4-苯基丁酸钠组(OVA+4-PBA组),每组6只。OVA组、OVA+3-MA组和OVA+4-PBA组均以卵清白蛋白(OVA)致敏、激发构建哮喘模型,PBS组则用PBS溶液致敏并激发作为对照处理；在激发前2 h,OVA+3-MA组给予3-甲基腺嘌呤腹腔注射,OVA+4-PBA组给予4-苯基丁酸钠腹腔注射。通过气道高反应性Penh值、BALF嗜酸粒细胞和肺组织的病理变化,确定哮喘模型的建立,观察各组小鼠肺组织胶原沉积情况和黏液分泌水平,检测肺组织中LC3B、Beclin1、Muc5ac、Atf6、Chop和Bip等蛋白含量的变化。结果 OVA组Penh值和BALF中嗜酸粒细胞明显高于PBS组(均P<0.05)；OVA+3-MA组和OVA+4-PBA组在乙酰甲胆碱浓度为6.25、12.50、25.00和50.00 g/L激发时,其Penh值显著低于OVA组(均P<0.05),BALF中嗜酸粒细胞也明显低于OVA组(P<0.05)。肺组织病理检查可见OVA组小鼠气管和肺血管周围表现出明显的炎症细胞浸润,肺泡间隔增厚、结构破坏,平滑肌层增厚,胶原沉积和杯状细胞增生；OVA+3-MA组和OVA+4-PBA组小鼠气管和肺血管周炎症细胞浸润、肺泡间隔增厚、结构破坏,胶原沉积和杯状细胞增生均较OVA组明显减少；PBS组未见明显病理损害、胶原沉积和杯状细胞增生。Western blot检测可见OVA组LC3 Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、Muc5ac、Atf6、Chop和Bip等蛋白表达量(1.09±0.04vs 0.34±0.09,0.18±0.01vs 0.06±0.01,1.90±0.38vs 0.46±0.11,1.67±0.18vs 0.41±0.08,2.96±0.45vs 1.11±0.10,2.07±0.34vs 0.49±0.17)较PBS组均明显高(P<0.05)；OVA+3-MA组和OVA+4-PBA组LC3 Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、Muc5ac、Atf6、Chop、Bip等蛋白表达量(0.46±0.07vs 1.09±0.04,0.63±0.03vs 1.09±0.04；0.11±0.02vs 0.18±0.01,0.12±0.02vs 0.18±0.01；0.72±0.22vs 1.90±0.38,0.57±0.13vs 1.90±0.38；1.06±0.12vs 1.67±0.18,1.02±0.12vs 1.67±0.18；1.67±0.21vs 2.96±0.45,1.10±0.15vs 2.96±0.45；1.03±0.11vs 2.07±0.34,0.97±0.10vs 2.07±0.34)较OVA组均明显降低(P<0.05)。结论 3-MA可以抑制哮喘小鼠的气道炎症,减轻气道高反应和黏液分泌,其机制可能与抑制细胞自噬,从而抑制内质网应激反应有关。

• 单位
  西南医科大学