hPOT1 RNA干扰对人胃癌BGC823细胞突变型p53表达的影响

作者：宁晓燕; 房殿春; 郭丽萍; 李宜成; 帖君; 杨仕明; 汪荣泉; 彭贵勇; 陈文生

来源：胃肠病学和肝病学杂志, 2008, (05): 390-393.

• 人端粒保护蛋白
• 人胃癌细胞
• RNA干扰
• 突变型p53

目的通过RNA干扰技术抑制人胃癌细胞BGC823中人端粒保护蛋白(human protection of telomeres 1,hPOT1)的表达,观察hPOT1 RNA干扰对胃癌BGC823细胞突变型p53基因转录水平的影响。方法从hPOT1编码区外显子8的区域选取一段19个碱基的序列gtactagaagcctatctca为RNA干扰靶向序列,构建hPOT1的RNA干扰真核表达载体,转入体外培养的低分化人胃癌细胞BGC823,提取细胞总RNA,半定量RT-PCR检测hPOT1和突变型p53基因mRNA表达水平的改变,验证hPOT1 RNA干扰载体的基因沉默效率,了解抑制hPOT1表达后突变型p53基因mRNA水平的改变。结果经DNA测序鉴定,hPOT1 RNA干扰载体包含干扰序列的插入片段,插入位置正确。经半定量RT-PCR鉴定,RNA干扰组细胞的hPOT1 mRNA表达水平明显下调,基因沉默效率在70%左右;突变型p53表达下调。结论通过RNA干扰技术抑制人胃癌细胞BGC823中hPOT1表达后,突变型p53表达下调,提示hPOT1与突变型p53之间有一定的相关性。

• 单位
  第三军医大学西南医院; 解放军第一医院; 第三军医大学大坪医院