摘要
目的:探讨促排卵方案及小鼠体外受精环节中去除颗粒细胞、精液洗涤、精卵共孵育时间对昆明小鼠体外受精的影响,为人类辅助生殖技术提供理论基础,并为新开展的辅助生殖实验室建立质控提供更直接可靠的方法。方法:(1)对昆明小鼠促排卵,促排药物孕马血清(PMSG)+绒毛膜促性腺激素(HCG)分为三个组合,分别为6 IU+6 IU,8 IU+8 IU,10 IU+10 IU,统计并比较三组获得的卵子数。(2)分别用卵丘复合体和去除卵丘的卵母细胞与小鼠精子进行体外受精,比较两组受精率。(3)用上游法和简单洗涤法处理小鼠精子,进行体外受精,比较两组受精率。(4)精卵共孵育4 h和16 h,比较两组受精率。结果:(1)促排药物PMSG+HCG为8 IU+8 IU时获得卵子数量显著高于其他两组(P<0.05)。(2)卵丘复合体和去除卵丘的卵母细胞相比,受精率显著增高(P<0.05)。(3)简单洗涤法洗涤精子后与卵子受精比上游法处理精子受精率高(P<0.05)。(4)精卵共孵育4 h的受精率高于共孵育16 h受精率(P<0.05)。结论:选择合适的促排卵药物组合PMSG 8 IU和HCG 8 IU可以获得最多数量的卵子,减少小鼠资源的浪费,体外受精时去除卵丘复合体的卵丘细胞导致受精率显著下降,洗涤法处理精液较上游法明显提高受精率,短时受精能减少氧化应激对受精过程的影响,较隔夜受精受精率高。
-
单位浙江大学医学院附属第二医院