华蟾酥毒基通过调控基质金属蛋白酶抑制食管癌细胞侵袭转移的作用

作者：邓旭; 盛杰霞; 王佳宝; 代二庆^*; 邓全军

来源：中国临床药理学杂志, 2019, 35(02): 133-136.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2019.02.011

• 华蟾酥毒基
• 食管癌
• 侵袭
• 迁移
• 基质金属蛋白酶
• 黏着斑激酶

目的研究华蟾酥毒基对食管癌细胞侵袭转移的影响。方法分别将食管癌EC-109和Kyse-150细胞分为4组:对照组和3个浓度实验组。对照组加入含有溶媒(0. 1%DMSO)的培养基,低、中、高3个浓度实验组给予25,50,100 nmol·L-1华蟾酥毒基,处理1 d。用划痕实验和Transwell小室法检测各组细胞迁移水平和侵袭能力,用免疫印迹实验检测细胞中磷酸化黏着斑激酶Tyr397[p-FAK(Tyr397)]、P53、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白表达情况,用实时荧光定量PCR检测各组细胞中上述指标mRNA的相对表达水平。结果 EC-109细胞:以25～100 nmol·L-1的华蟾酥毒基处理1 d后,实验组划痕愈合面积约为(9. 96±1. 17)%～(5. 02±0. 92)%,侵袭细胞数约为(162. 33±12. 01)～(42. 33±12. 50)个;与对照组的(23. 80±1. 32)%和(254. 33±14. 01)个相比,差异均有统计学意义(均P <0. 01)。低、中、高3个浓度实验组的MMP-2蛋白表达水平分别为0. 74±0. 04,0. 54±0. 06和0. 44±0. 05。中、高2个浓度实验组的MMP-9蛋白表达分别为0. 69±0. 08,0. 52±0. 04;这2组的p-FAK (Tyr397)的表达水平分别为0. 90±0. 08,0. 62±0. 06;这2组的P53蛋白表达水平分别为1. 20±0. 06,2. 86±0. 05;这2组的PTEN蛋白表达水平分别为1. 31±0. 06,1. 53±0. 05,与对照组的(1. 00±0. 00)比较,差异均有统计学意义(均P <0. 01);在同样的处理条件下,实验组上述指标的mRNA的表达变化与蛋白表达趋势相同。Kyse-150细胞:迁移和侵袭能力的改变以及各指标的表达变化与EC-109细胞趋势相同。结论华蟾酥毒基可能通过上调P53和PTEN表达,下调FAK的磷酸化及其下游分子MMP-2和MMP-9的表达,进而抑制食管癌细胞的迁移和侵袭。

• 单位
  中国人民武装警察部队后勤学院附属医院; 锦州医科大学