PCV-2 ORF2和PRRSV ORF5基因的扩增与双基因真核表达载体的构建

作者：赵鸿雁; 李俊; 丛晓燕; 曹帅; 王文志; 张秀美; 王金宝

来源：动物医学进展, 2006, (11): 61-64.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2006.11.017

• 猪圆环病毒2型
• ORF2
• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• ORF5
• 真核表达载体 PCV-2
• ORF2
• PRRSV
• ORF5
• eukaryotic expressing vector

根据GenBank中猪圆环病毒2型ORF2基因序列和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因序列,分别设计一对引物,应用PCR和RT-PCR扩增出PCV-2 ORF2基因和PRRSV ORF5基因。将PCR产物ORF2经NheⅠ/EcoRⅠ双酶切回收后插入真核表达载体pIRES得到pIRES-ORF2,RT-PCR产物ORF5经NotⅠ/XbaⅠ双酶切回收后插入pIRES-ORF2构建重组质粒pIRES-ORF2/ORF5。对此质粒中的插入片段,进行PCR RT-PCR及双酶切鉴定,同时对插入序列进行测序分析,表明SD1株ORF2与国内多种毒株的同源性为99%,pIRES-ORF2ORF5转移载体O...

• 单位
  山东省农业科学院; 青岛农业大学