双组份系统EnvZ/OmpR促进副溶血弧菌抵抗碱胁迫的作用机制

作者：姚宁; 鲁重; 王菲; 钟孝俊; 杨梦华

来源：微生物学报, 2022, 1-15.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20220249

• 副溶血弧菌
• 双组份系统
• EnvZ/OmpR
• 碱胁迫

【目的】探究双组份系统EnvZ/OmpR对副溶血弧菌抵抗碱胁迫的作用机制。【方法】使用SMART在线工具（https://smart.embl.de/）鉴定出副溶血弧菌基因组中的双组份系统EnvZ/OmpR，再利用同源重组技术将envZ和ompR基因分别进行缺失，构建相应回补株，比较各菌株的生长曲线来检测相应基因对细菌适应高渗透胁迫和碱胁迫的作用，并结合qRT-PCR及荧光检测系统，筛选参与EnvZ/OmpR抵抗碱胁迫的下游靶基因，鉴定该双组份系统对下游基因的调控机制。【结果】在副溶血弧菌基因组中鉴定出vp0155/vp0154编码EnvZ/OmpR双组份系统同源蛋白。ΔompR菌株在高渗透胁迫和碱胁迫中的生长能力明显弱于野生株，而CΔompR，以及ΔenvZ和CΔenvZ菌株生长能力与野生株类似。在ΔompR菌株中，孔道蛋白基因vp1218、vp0493、vpa1745、vpa0085与vpa1308的转录水平均明显低于野生株，并且发现这些孔道蛋白基因缺失株（Δvpa1308除外）在碱性环境中生长能力均明显弱于野生株。OmpR蛋白可直接抑制调控因子AphB基因转录，而ΔaphB菌株在碱胁迫中的生长能力明显强于野生株。此外，AphB蛋白可直接抑制孔道蛋白基因vp0493和vpa0085转录。【结论】双组份系统EnvZ/OmpR促进副溶血弧菌抵抗碱胁迫，其中OmpR蛋白可通过抑制调控因子AphB的表达，以促进部分孔道蛋白的表达，从而增强副溶血弧菌抵抗碱胁迫的能力。

• 单位
  浙江农林大学; 动物科技学院