摘要
目的改良胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠脾脏来源耐受性树突状细胞(DC)的制备技术,以获取高质量的实验细胞。方法在提取脾脏单个核细胞过程中,对制备单细胞悬液流程以及单个核细胞铺板后孵育时间进行改进,培养初期加入核因子κB(NF-κB)寡核苷酸诱骗剂诱导为耐受性DC。显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色观察细胞活力,流式细胞术检测细胞CD103(OX62)、 CD80和CD86表达,噻唑蓝(MTT)法检测该DC刺激淋巴细胞的增殖能力。结果 DC的细胞活力>90%, OX62表达率>87.4%;共刺激分子低表达, DC刺激淋巴细胞增殖能力低。结论将CIA大鼠脾脏单个核细胞的制备方法进行改良,经NF-κB寡核苷酸诱骗剂诱导可获得高活力、高稳定性的耐受性DC,且细胞纯度明显提高。
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