甘蓝型油菜SNARE蛋白SYP122叶片瞬时表达体系的建立

作者：许静; 单亚楠; 何豆; 陈淞渝; 庄炜; 王爱荣^*

来源：福建农林大学学报（自然科学版）, 2019, 48(04): 459-465.

DOI：10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2019.04.009

• 油菜
• 瞬时表达
• 真空渗透法
• BnSYP122
• 绿色荧光蛋白

通过生物信息学鉴定了油菜中的突触融合蛋白BnSYP122,其由一个N端syntaxin结构域、一个典型的SNARE基序及一个C端跨膜结构域组成,并且N端结构域包含被称为Ha、Hb、Hc基序的3个α-螺旋束.进一步利用Gateway技术成功将目的蛋白构建于植物表达载体pEarleyGate 104上,与带有绿色荧光蛋白的pEGAD分别转化农杆菌GV3101菌株,采用农杆菌介导的真空渗透法在油菜叶片中进行瞬时表达.经激光共聚焦显微镜观察和Western blot检测表明,农杆菌介导的真空渗透法能够在油菜叶片中成功表达目的蛋白,同时验证了BnSYP122定位在细胞膜上.

• 单位
  福建农林大学