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摘要
目的 探讨上皮细胞转化序列2(ECT2)通过调控PI3K/AKT信号通路对胰腺癌细胞恶性行为、糖酵解及TH细胞分化的影响。方法 RT-qRCR检测人脐静脉内皮细胞系HUVEC及胰腺癌细胞中ECT2 mRNA表达，将胰腺癌Panc-1细胞株分为胰腺癌组（Panc-1细胞株正常培养）、NC组（Panc-1细胞株转染ECT2阴性对照）、ECT2 siRNA组（Panc-1细胞株转染ECT2 siRNA）、抑制剂组（Panc-1细胞株转染加入PI3K/AKT抑制剂LY294002,ECT2 siRNA+抑制剂组（Panc-1细胞株转染ECT2 siRNA加入PI3K/AKT抑制剂LY294002），采用RT-qRCR各组细胞中ECT2 mRNA表达；Transwell法检测各组Panc-1细胞侵袭能力；划痕实验检测迁移；流式细胞仪检测各组细胞IFN-γ及IL-4表达；免疫印迹分别检测糖酵解代表蛋白及PI3K/AKT表达。结果 胰腺癌组、NC组、ECT2 siRNA组、抑制剂组及ECT2 siRNA+抑制剂组的ECT2 mRNA比较分别为1.00±0.00、0.95±0.03、0.41±0.08、0.65±0.05及0.20±0.04，组间比较，差异有统计学意义（F=310.700,P<0.05）；胰腺癌组、NC组、ECT2 siRNA组、抑制剂组及ECT2 siRNA+抑制剂组Panc-1细胞侵袭数目分别为（256.30±28.36）个、（241.18±24.05）个、（155.48±17.56）个、（178.90±18.44）个及（95.15±12.10）个，组间比较，差异有统计学意义（F=59.310,P<0.01）；胰腺癌组、NC组、ECT2 siRNA组、抑制剂组及ECT2 siRNA+抑制剂组Panc-1细胞迁移距离分别为（14.02±1.36）mm、（13.42±1.29）mm、（9.25±0.85）mm、（8.50±0.45）mm及（4.25±0.53）mm，组间比较差异有统计学意义（F=101.200,P<0.05）;ECT2 siRNA组细胞IFN-γ升高及IL-4占比降低，与NC组比较，差异有统计学意义（P<0.05），与抑制剂组相比，ECT2 siRNA+抑制剂组细胞IFN-γ升高及IL-4占比降低，组间比较差异有统计学意义（P<0.05）;ECT2 siRNA组细胞HIF-1α、GLUT1、HK-Ⅱ和PFK蛋白均降低，与抑制剂组无意义（P>0.05），与抑制剂组相比，ECT2 siRNA+抑制剂组细胞HIF-1α、GLUT1、HK-Ⅱ和PFK蛋白降低，组间比较差异有统计学意义（P<0.05）;ECT2 siRNA组细胞HIF-1α、GLUT1、HK-Ⅱ和PFK蛋白均降低，与NC组差异有统计学意义（P<0.05），与抑制剂组相比，ECT2 siRNA+抑制剂组细胞HIF-1α、GLUT1、HK-Ⅱ和PFK蛋白降低，组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 抑制ECT2可通过降低胰腺癌细胞糖酵解，提高Th细胞中IFN-γ表达而抑制恶性侵袭及迁移，其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路活性相关。
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单位德阳市人民医院
