HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒表达系统的构建与鉴定

作者：黄桂填; 肖焕擎; 曾山崎; 徐波; 蔡文松; 李书华

来源：广州医学院学报, 2011, (02): 102-105+111.

• 人端粒酶逆转录酶启动
• NK4基因
• 腺病毒 human telomerase reverse transcriptase promoter(hTERTp)
• NK4 gene
• adenovirus

目的:构建靶向结肠癌细胞的人端粒酶逆转录酶HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒并对该表达体系进行鉴定。方法:根据GenBank中的HTERT启动子(HTERTp)序列设计引物,以人胚肾293细胞提取基因组DNA为模板,PCR扩增HTERTp,并将HTERTp序列克隆入pDC312质粒中,构建成HTERTp调控的腺病毒质粒pSG-HTERTp;NK4 cDNA酶切并回收克隆至pSG-HTERTp载体中,构建成pSG-HTERTp/pA-NK4穿梭质粒,脂质体法在293细胞中包装重组腺病毒;噬斑分析法筛选单克隆重组腺病毒;RT-PCR检测NK4基因的转录;Western Blot检测NK4蛋...

• 单位
  广州医科大学; 广州市第一人民医院