中国流行株C基因型HBV稳定复制表达小鼠模型的建立

作者：杨悦; 高俪; 许智慧; 余双庆; 李瑞生; 黄鹏宇; 乔艳; 李进; 董小岩; 吴小兵; 刘妍; 徐东平

来源：解放军医学杂志, 2016, 41(10): 793-797.

• 乙型肝炎病毒
• 基因型
• 模型,动物

目的构建稳定复制中国流行株C基因型HBV的小鼠模型。方法将携带1.3倍C基因型HBV基因组(adr血清型)的重组腺相关病毒r AAV8-1.3HBV-C转导人肝癌细胞Hu H7,采用ELISA法评估HBV抗原(HBs Ag、HBe Ag)在肝癌细胞中的表达。筛选高表达的重组病毒,经尾静脉注射入68周龄C57BL/6小鼠体内,建立HBV-C复制小鼠模型(实验组,n=8);同时建立文献已报道HBV-D复制小鼠模型(对照组,n=7,r AAV8-1.3HBV-D,ayw血清型)。动态监测两组小鼠血清(眼底静脉丛采血)HBV DNA载量和HBs Ag、HBe Ag的抗原表达量;于第9周处死小鼠,HE染色观察肝组织病理改变,免疫组化染色分析HBs Ag和HBc Ag的表达。结果重组病毒r AAV8-1.3HBV-C体外转导人肝癌细胞Hu H7,72h后细胞上清中可检测到HBs Ag和HBe Ag的表达。小鼠注射重组病毒后第2、3、5、7、9周,血清HBV DNA存在稳定复制,血清HBe Ag表达水平较稳定,但血清HBs Ag表达存在波动。两组小鼠肝组织未见明显的炎性细胞浸润及组织结构异常,但可检测到HBs Ag和HBc Ag蛋白。结论利用高嗜肝性重组8型腺相关病毒载体携带1.3倍C基因型HBV基因组体内转导C57BL/6小鼠,成功地建立了稳定复制并持续表达C基因型HBV的小鼠模型。

• 单位
  桂林医学院; 解放军302医院