摘要
【目的】构建抗鼻咽癌单克隆抗体 BAC5单链抗体的原核表达载体并观察其表达,为开展抗鼻咽癌单链抗体的进一步研究奠定基础。【方法】应用 RT-PCR 技术,扩增出鼻咽癌单克隆抗体 BAC5的轻链、重链可变区基因,通过一段编码肽的序列进行连接,构建 BAC5单链抗体表达载体 pET22b-scFv,导入 BL21(DE3)表达菌,并进行诱导表达。SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定融合蛋白的表达。【结果】克隆基因序列符合小鼠轻、重链可变区基因特征;pET22b-scFv 表达质粒拼接正确;表达产物以包涵体形式为主。【结论】成功构建了能表达 BAC5单链抗体的原核表达载体。
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单位中山大学中山医学院; 中山大学肿瘤防治中心