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摘要
目的肿瘤放化疗目的之一即诱导肿瘤细胞凋亡,分子影像方法可以早期无创检测细胞凋亡进而评价疗效。本研究构建新型99Tcm标记的Caspase-3多肽活性显像剂99Tcm-CP3-peptide,并无创性检测放疗后体外和体内人肺鳞癌H520细胞凋亡情况。方法采用双功能螯合法对药物前体进行99Tcm标记,然后对初产物进行纯化,分别检测纯化前后产物放射性化学纯度;在经放疗（2或4Gy）处理的人肺鳞癌H520细胞中进行体外细胞结合测定,应用流式细胞术检测细胞凋亡率,评价99Tcm-CP3-peptide放射性摄取率与细胞凋亡率相关性;应用荷H520肿瘤裸鼠进行99Tcm-CP3-peptide显像研究。荷瘤裸鼠放疗（0、4和8Gy）后24h经鼠尾静脉注射99Tcm-CP3-peptide,1h后行单光子发射型电子计算机断层扫描仪（single photon emission type computed tomography scanner,SPECT）显像,勾画感兴趣区,并计算肿瘤与对侧正常肌肉组织（T/NT）放射性比值。离体检测肿瘤与对侧肌肉组织对99Tcm-CP3-peptide摄取率,肿瘤组织进行TUNEL检测。结果纯化后99Tcm-CP3-peptide HPLC图谱上只有1个主峰,且标记后1、2、4h放化纯分别为（99.30±0.38）%、（99.02±0.13）%和（97.33±0.12）%;H520细胞放疗后24h剂量为2和4Gy组示踪剂结合分别为（0.29±0.00）%和（0.41±0.00）%,高于对照组（0.13±0.00）%,差异有统计学意义,F=110.14,P=0.001;放疗后48h剂量为2和4Gy组细胞摄取率分别为（0.38±0.01）%和（0.48±0.03）%,高于对照组（0.15±0.01）%,差异有统计学意义,F=380.26,P=0.001;细胞对示踪剂摄取率与流式细胞检测细胞凋亡率具有相关性,r=0.96,P=0.002;荷H520细胞裸鼠SPECT显像示,实验组可见肿瘤放射性浓集。放疗剂量4和8Gy肿瘤组织摄取率分别为（2.56±0.08）%和（2.98±0.17）%ID/g,高于对照组（0.58±0.03）%ID/g,F=184.74,P=0.001;肿瘤组织摄取率与TUNEL检测细胞凋亡率呈正相关,r=0.95,P=0.001。结论 99Tcm-CP3-peptide成功构建,4h内放射化学纯度高且保持稳定。放疗后人肺鳞癌H520细胞对99Tcm-CP3-peptide摄取增加,随着放疗剂量增大,摄取率增加,并与其他凋亡监测结果有相关性。99 Tc m-CP3-peptide可以早期无创性监测肿瘤细胞凋亡。
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