柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建

作者：林青; 才学鹏; 窦永喜; 翟军军; 闫鸿斌; 张彦明; 田广孚; 景志忠

来源：畜牧兽医学报, 2007, (09): 999-1002.

• 柔嫩艾美耳球虫
• 孢子化卵囊
• 子孢子
• cDNA表达文库
• 构建 Eimeria tenella
• sporulated oocysts
• sporozoites
• cDNA expression library
• construction

在无RNase污染的环境下,提取柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)子孢子RNA,进而纯化mRNA,采用Oligo(dT)引物反转录合成cDNA第一链和第二链,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ黏性末端的λSCREEN载体的两臂之间。用Phage Maker extract对以上连接产物进行体外包装,形成完整的噬菌体,并用该噬菌体转染大肠杆菌ER1647,进行文库容量测定和扩增。以扩增文库的DNA为模板,利用已知基因引物克隆E. tenella3-1E基因,并进行测序。结果表明,成功构建了E. tenella孢子化...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 西北农林科技大学; 动物科技学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所