神经元癫癇模型miRNA-212对BDNF/TrkB信号转导通路影响的研究

作者：蔡浩; 吴秋静; 朱延霞; 赵文; 李斌; 宋毅军

来源：中国现代神经疾病杂志, 2014, 14(11): 972-978.

• 癫癇
• 海马
• 脑源性神经营养因子
• 蛋白酪氨酸激酶类
• 微RNAs
• 转染
• 免疫印迹法
• 细胞,培养的

目的探讨海马神经元癫癇模型转染微小RNA(mi RNA)-212对脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(Trk B)信号转导通路的影响。方法经体外培养7 d的大鼠海马神经元(正常对照组),通过无镁离子细胞外液处理(3 h)方法建立癫癇神经元模型(癫癇模型组),继而以含镁离子正常细胞外液与慢病毒稀释液转染构建mi RNA-212慢病毒表达载体;免疫荧光双染法、膜片钳技术和免疫印迹法观察转染mi RNA-212对BDNF/Trk B信号转导通路的影响。结果无论是正常海马神经元或癫癇神经元模型,与BDNF共培养后其磷酸化Trk B(p Trk B)/Trk B比值均显著升高(P=0.001),表明BDNF/Trk B信号转导通路被激活;转染mi RNA-212后,癫癇神经元模型p Trk B/Trk B比值降低并低于未转染者(P=0.001),提示BDNF/Trk B信号转导通路受到抑制。结论 BDNF具有激活海马神经元BDNF/Trk B信号转导通路作用,而转染mi RNA-212可抑制BDNF/Trk B信号转导通路。

• 单位
  天津医科大学; 神经内科; 天津医科大学总医院