摘要
目的 观察复方石斛合剂对糖尿病大鼠肝GCGR/PKA信号通路分子基因和蛋白表达的影响,探讨其抑制肝糖异生的分子机制。方法 SPF级Wistar大鼠50只,随机选取11只作为正常组,其余39只高脂高糖饲料喂养6周后腹腔注射2次STZ,间隔72 h,筛选出糖尿病成模大鼠36只,随机分为模型组、二甲双胍组和石斛合剂组。石斛合剂组给予石斛合剂(11.3 g·kg-1)灌胃,二甲双胍组以二甲双胍灌胃(100 mg·kg-1),正常组和模型组以生理盐水灌胃,连续给药12周。检测各组大鼠空腹血糖(Fasting blood glucose, FBG);ELISA方法检测血清胰高血糖素(Glucagon);RT-PCR法检测GCGR/PKA信号通路的肝糖异生相关基因表达。免疫组化法和Western Blot法检测上述信号通路肝糖异生相关蛋白表达。结果 石斛合剂组FBG、Glucagon较模型组显著下降(P<0.01);免疫组化结果显示石斛合剂能显著抑制GCGR、G6Pase的表达(P<0.01);RT-PCR和Western blot结果显示石斛合剂组β-catenin、TCF7L2基因和蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01);GCGR、PKA基因和蛋白表达减少(P<0.05,P<0.01)。结论 石斛合剂能控制糖尿病模型大鼠的空腹血糖,抑制肝糖异生,可能与其通过调控GCGR/PKA信号通路相关信号分子的基因和蛋白表达有关。
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