牛病毒性腹泻病毒鉴定及分型RT-PCR检测方法的建立

作者：李新培; 朱洪伟; 周伟光; 关平原; 程世鹏; 温永俊^*

来源：动物医学进展, 2018, 39(10): 6-12.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2018.10.002

• 牛病毒性腹泻病毒
• 鉴定
• 分型
• 反转录-聚合酶链反应

旨在建立一种特异性检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的RT-PCR方法,并且可以实现在同一体系中对BVDV进行分型。根据GenBank中公布的BVDV基因组序列,针对高度保守的5′UTR区域分别设计鉴定及分型引物,建立牛病毒性腹泻病毒鉴定及分型RT-PCR检测方法。应用鉴定RT-PCR检测方法可从BVDV阳性毒株中扩增出288bp的特异性片段;而分型RT-PCR检测方法可在同一体系中从BVDV1型和2型毒株中扩增出大小分别为316bp和110bp的特异性片段,但对猪瘟病毒、牛副流感3型病毒及牛传染性鼻气管炎病毒等均为阴性,最低可检测出的病毒量分别为1TCID50/mL和10TCID50/mL。临床试验证明,建立的鉴定及分型RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,具有很高的实用价值,为进一步开展流行病学调查、病毒分离等提供可靠的技术手段。

• 单位
  农业部; 分子生物学国家重点实验室; 内蒙古农业大学; 中国农业科学院特产研究所