微小牛蜱Bm86基因的克隆与原核表达

作者：樊瑞泉; 罗建勋; 杨孝朴; 殷宏; 高金亮; 关贵全; 刘志杰; 党志胜; 马米玲; 任巧云; 刘爱红

来源：甘肃农业大学学报, 2007, (01): 15-19.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2007.01.004

• 微小牛蜱
• Bm86基因
• 克隆
• 表达 Boophilus microplus-Bm86 gene-clone-expression

根据已发表的Bm86基因序列,设计表达型引物,利用RT-PCR技术,从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因,将PCR产物连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86.测序分析表明:克隆的微小牛蜱Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm86基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97%和95.6%.然后对重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86进行双酶切,获得带有粘性末端的Bm86基因片段,并将此片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Bm86,将其转化到BL21宿主菌中,用IPTG进行诱导表达.SD...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 甘肃农业大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室