低浓度氯喹保护成年小鼠视网膜神经节细胞抵抗N-甲基-D-天冬氨酸的兴奋性毒性作用

作者：刘一帆; 沈吟^*

来源：中华眼底病杂志, 2020, 36(04).

• 氯喹
• 视网膜神经节细胞
• N-甲基天冬氨酸
• 毒性作用
• 动物实验

目的观察不同浓度氯喹对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)损伤模型小鼠RGC的保护作用及可能调控机制。方法健康雄性C57/BL6小鼠54只, 随机分为氯喹低浓度组、氯喹高浓度组、PBS对照组, 每组均为18只。氯喹低浓度组、氯喹高浓度组小鼠分别按体重10、100 mg/kg剂量腹腔注射氯喹;PBS组小鼠腹腔注射等体积PBS。腹腔注射1次/d, 连续2d后, 氯喹低浓度组、氯喹高浓度组小鼠左眼玻璃体腔注射5 nmol/L NMDA, 对侧眼注射等体积PBS。建模后7d, 视网膜铺片RGC染色, 计数RGC存活数目;建模后9、10d, 分别行视动反应和ERG检查;建模后11 d, 行视网膜免疫荧光染色检测各组小鼠视网膜胶质纤维酸性蛋白(GFAP)荧光表达和实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测各组小鼠视网膜GFAP、TNF-α、IL-6 mRNA表达。各组间RGC密度、视敏度、光负性反应(PhNR)波振幅比较采用单因素方差分析。结果建模后7d, 与PBS对照组小鼠RGC密度比较, 氯喹低浓度组显著升高, 差异有统计学意义(F=54.41, P<0.01);氯喹高浓度组降低, 但差异无统计学意义(F=1.18, P>0.05)。氯喹低浓度组小鼠视敏度、PhNR波振幅均高于PBS对照组, 差异有统计学意义(F=9.10、17.60, P<0.05、<0.01 )。氯喹低浓度组小鼠视网膜GFAP绿色荧光表达明显少于PBS对照组、氯喹高浓度组, 差异有统计学意义(F=23.66, P<0.05 )。低浓度氯喹组小鼠视网膜GFAP (F=110.20)、IL-6 (F=167.60)、TNF-α (F=17.78)mRNA表达较高浓度氯喹组、PBS对照组显著下降, 差异有统计学意义(P<0.010、<0.001、<0.010)。结论低浓度氯喹对NMDA损伤所致RGC丢失有保护作用, 其作用机制可能与抑制胶质细胞活化与炎症反应有关;高浓度氯喹会加重RGC凋亡。

• 单位
  武汉大学人民医院