聚乙二醇一聚乙烯亚胺介导小干扰RNA体外转染神经干细胞的研究

作者:梁嫣然; 刘中霖; 毕伟; 帅心涛; 王伟伟; 陶恩祥
来源:中华神经医学杂志, 2011, 10(8): 784-788.
DOI:10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2011.08.007

摘要

目的 研究聚乙二醇—聚乙烯亚胺(PEG-PEI)作为非病毒纳米载体介导小干扰RNA(siRNA)体外转染C17.2 NSCs的效果。 方法 采用自行设计合成的PEG-PEI与靶向Nogo受体复合体基因的siRNA形成复合物,通过粒径与电位的测定、凝胶阻滞电泳实验等方法观察PEG-PEI/siRNA纳米复合物的表征及复合效果。以脂质体复合体系Lipofectamine 2000/siRNA为对照,采用流式细胞仪检测不同N/P比(PEG-PEI中氮原子和siRNA中磷原子的摩尔比)的PEG-PEI/siRNA复合物对NSCs的转染效率。 结果 PEG-PEI和siRNA形成粒径为纳米级别的复合物,随着N/P比增大,复合物的粒径逐渐减小,而表面电位逐渐增大。凝胶阻滞电泳实验表明siRNA与PEG-PEI可以通过静电相互作用而稳定结合。流式细胞仪检测细胞转染率后发现,N/P=15时,PEG-PEI/siRNA复合物转染率最高,可达(78.72±8.18)%。 结论 PEG-PEI是一种有良好发展前景的非病毒型siRNA转运载体,对神经干细胞基因治疗具有潜在的应用价值。

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