H4、N2和所有亚型禽流感三重RT-PCR检测方法的建立

作者：罗思思; 谢芝勋^*; 李孟; 黄娇玲; 李丹; 谢丽基; 张民秀; 曾婷婷; 王盛; 张艳芳; 范晴; 谢志勤; 邓显文

来源：中国兽药杂志, 2020, 54(02): 16-21.

DOI：10.11751/ISSN.1002-1280.2020.02.03

• 禽流感
• H4亚型
• N2亚型
• 三重RT-PCR

为建立一种同时检测H4、N2和所有亚型禽流感的方法,分别针对H4亚型禽流感病毒(AIV) HA基因、N2亚型AIV NA基因和所有亚型AIV M基因保守序列,设计筛选出3对特异性引物,优化引物之间的浓度,对三重反应体系进行特异性和敏感性验证,建立了H4、N2和所有亚型AIV三重RT-PCR检测方法,并用该法对临床样品进行检测。建立的方法能特异性扩增H4、N2和所有亚型AIV,与其他禽病病原体不发生交叉反应;对H4、N2和所有亚型AIV至少能检测到6 pg/μL。在185份临床样品的检测中,检出4份H4、10份N2和19份AIV阳性。所建立的三重RT-PCR方法特异性强、灵敏度高,为快速检测H4、N2和所有亚型AIV提供了有效的方法。

• 单位
  广西壮族自治区兽医研究所