转录因子KLF7对IL-6基因的转录调控分析

作者：王宁; 尤欣; 徐海冬; 娄明; 娄钰琦; 闫晓红; 李辉

来源：东北农业大学学报, 2020, 51(10): 45-55.

DOI：10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2020.10.06

• 鼠
• KLF7
• IL-6
• 启动子
• 转录调控

选取小鼠IL-6基因转录起始位点上游2 000 bp序列作为启动子序列,采用在线生物信息学软件分析转录因子结合位点;利用PCR扩增小鼠IL-6基因启动子及其5’端截短突变体片段,构建相应的荧光素酶报告基因重组质粒,转染3T3-L1细胞后检测报告基因活性;采用共转染分析转录因子KLF7对IL-6基因启动子活性的影响;利用siRNA技术探究敲低KLF7对细胞内源性IL-6基因表达的影响。生物信息学分析显示,小鼠IL-6基因启动子区存在5个Sp1/KLFs结合位点;报告基因分析和定点突变分析发现,KLF7通过IL-6基因启动子区-98至-89 bp处(CCCCACCCAC)发挥调控IL-6基因启动子活性的作用;Real-time RT-PCR和Western blot分析显示,敲低KLF7抑制细胞内源性IL-6基因表达。文章首次发现KLF7直接调控IL-6基因表达,研究结果对揭示KLF7在脂肪生成中的作用机制具有重要意义。

• 单位
  东北农业大学