液相色谱-串联质谱法同时测定对乙酰氨基酚及其相关代谢产物

作者：郭波; 唐秀玲; 石磊; 党学良; 张琰

来源：中国药师, 2017, 20(04): 597-616.

• 液相色谱-串联质谱法
• 对乙酰氨基酚
• 代谢产物

目的:建立一种检测小鼠血浆中对乙酰氨基酚(APAP)及其5个代谢产物的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,将之应用于对乙酰氨基酚的代谢研究。方法:血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以对氨基苯甲酸(PABA)为内标,采用LC-MS/MS法,C18色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L-1乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)(55∶45),流速为0.5 ml·min-1,柱温为25℃,采用电喷雾离子化(ESI),正离子多反应监测(MRM)检测方式进行定量分析:APAP,[M-H]-,m/z 152.0→110.0;APAP-cys,[MH]-,m/z 271.2→140.1;APAP-glut,[M-H]-,m/z 457.0→328.0;APAP-NAC,[M-H]-,m/z 313.4→208.0;APAP-sulf,[MH]-,m/z 232.4→152.1;APAP-gluc,[M-H]-,m/z 328.2→152.1;IS,[M-H]-,m/z 138.2→120.0。结果:在0.210μg·ml-1(APAP)、1.020μg·ml-1(APAP-gluc)、1.020μg·ml-1(APAP-sulf)、1.020μg·ml-1(APAP-glut)、0.415μg·ml-1(APAP-NAC)和0.210μg·ml-1(APAP-cys)范围内线性良好(r≥0.990 0)。各测定物的日内精确度均在85%115%间,精密度均小于15%,加样回收率均在85%115%之间,RSD均低于15%。结论:该方法快速、灵敏、准确,适用于小鼠血浆中对乙酰氨基酚及其5个代谢产物的定量测定。

• 单位
  第四军医大学