醛糖还原酶AKR1B1与肺癌的相关性研究

作者：孙基丰; 孙婷婷; 李超; 金秀妍; 张昊^*

来源：长春理工大学学报(自然科学版), 2018, 41(06): 141-146.

• 醛糖还原酶AKR1B1
• 原核表达
• 酶联免疫检测
• 逆转录

在蛋白水平和核酸水平考察醛糖还原酶AKR1B1在肺癌细胞和肺细胞表达差异,研究醛糖还原酶AKR1B1肺癌的相关性。通过分子生物学手段,原核表达AKR1B1重组蛋白,制备AKR1B1小鼠多克隆抗体。利用ELISA、RT-PCR技术,检测肺细胞MRC-5和肺癌细胞A549的表达差异。AKR1B1蛋白原核表达的最适条件为:IPTG浓度1mmol/L,诱导时间24h,诱导温度为16℃时,蛋白含量达到1.9mg/ml。小鼠多克隆抗体,效价为1∶32000。醛糖还原酶AKR1B1在蛋白质水平上肺细胞与肺癌细胞的比例为1∶3;核酸水平上肺细胞与肺癌细胞的比例为1∶4.1。成功表达醛糖还原酶AKR1B1,在肺癌细胞中蛋白质与核酸表达量均比肺细胞中高,预示醛糖还原酶AKR1B1可能是肺癌标记物或者是作为治疗的药物靶点,本实验为肺癌的诊断及治疗提供实验依据及理论基础。

• 单位
  长春理工大学; 生命科学技术学院