敲除NOR1基因对人肝癌裸鼠移植瘤的影响及作用机制

作者：游焜; 王大军; 王亮; 王建国^*

来源：临床肝胆病杂志, 2020, 36(02): 381-386.

• 肝肿瘤
• 小鼠,近交BALB C
• NOR1基因

目的探究敲除NOR1基因后对人肝癌裸鼠移植瘤生长、存活率及器官损伤的影响。方法 SPF级雄性BALB/C裸鼠30只随机分为Control组(n=10)、Scramble组(n=10)、siNOR1组(n=10),构建阴性对照质粒(Scramble)和siNOR1质粒转染至HepG2细胞并接种至裸鼠构建移植瘤裸鼠模型。连续30 d每5 d检测裸鼠移植瘤组织体积;检测移植瘤重量;免疫组化检测Ki-67、Caspase-3、Notch、NOR1表达情况; Western Blot检测Survivin、Notch1、NICD、Hes1、Hey1蛋白表达量情况,HE染色观察肝、肾、肺、脑病理损伤程度。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验;生存分析采用Kaplan-Meier法,生存率的比较采用log-rank检验法。结果从建模第20天开始,与Control组相比,siNOR1组第20、25、30天移植瘤体积显著减小[(418. 71±78. 24) mm3vs (149. 6. 16±60. 05) mm3、(864. 22±125. 66) mm3vs (239. 83±100. 51) mm3、(1468. 45±199. 78)mm3vs (446. 54±147. 09) mm3,P值均<0. 05];第30天时取出移植瘤,与Control组相比,siNOR1组移植瘤质量显著减小[(0. 45±0. 07) g vs (0. 12±0. 04) g,P <0. 05];与Control组相比,siNOR1组移植瘤组织中Ki-67、Notch、NOR1阳性表达率显著降低[Ki-67:(48. 98±9. 75)%vs (11. 51±5. 09)%,Notch:(62. 51±9. 26)%vs (18. 75±4. 61)%,NOR1:(76. 33±8. 31)%vs (16. 57±3. 76)%,P值均<0. 05],Caspase-3阳性表达率显著升高[(6. 39±4. 67)%vs (38. 03±9. 28)%,P <0. 05]; siNOR1组模型裸鼠30 d内生存率显著高于Control组[(77. 66±6. 75)%vs (25. 32±4. 63)%,χ2=6. 897,P <0. 05]; Western Blot检测结果显示,与Control组相比,siNOR1组Survivin、Notch1、NICD、Hes1、Hey1蛋白表达水平均显著降低(Survivin:0. 34±0. 06 vs 0. 02±0. 01;Notch1:0. 16±0. 03 vs 0. 03±0. 01; NICD:0. 26±0. 05 vs 0. 04±0. 02; Hes1:0. 35±0. 04 vs 0. 06±0. 02; Hey:0. 29±0. 06 vs 0. 05±0. 02,P值均<0. 05),且siNOR1组裸鼠各组织器官损伤情况均得到有效缓解。结论敲除NOR1基因抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,提高模型裸鼠生存率,并缓解模型裸鼠肝、肾、肺、脑损伤,其机制可能与抑制Notch信号通路活性有关。

• 单位
  新乡医学院第一附属医院