摘要

目的探讨超声微泡联合穿膜肽介导HGF基因治疗大鼠急性心肌梗死的可行性。方法将40只SD大鼠建成心肌梗死模型后随机分为5组,即①空白对照组(C),②超声+空白微泡组(US+MB),③超声+载穿膜肽微泡组(US+MBTAT),④超声+载基因微泡组(US+MBHGF),⑤超声+载基因及穿膜肽微泡组(US+MBHGF+TAT)。于基因转染后7d处死各组大鼠,激光共聚焦显微镜观察pIRES2-EGFP-HGF在大鼠心肌内的表达情况。偏振光显微镜观察Ⅰ、Ⅲ型胶原在大鼠梗死心肌周边区的分布情况。免疫组织化学法(IHC)检测梗死心肌周边区CD34的表达,并在显微镜下计数心肌内新生微血管密度(MVD)。RT-PCR及Western Blot检测HGF的mRNA及蛋白的表达。结果 US+MBHGF+TAT组的绿色荧光强度高于其他各组,Ⅰ、Ⅲ型胶原明显少于其他各组,HGF mRNA及HGF蛋白的表达均高于各组,IHC结果显示新生的微血管被染成棕黄色,US+MBHGF+TAT组的MVD最高,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论超声微泡联合穿膜肽能够介导HGF基因在缺血心肌内的高效转染,并促进血管新生和改善纤维化,为缺血性心脏病的基因治疗提供一种新的基因转移途径。