表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因重组腺病毒的构建及鉴定

作者：王伟; 刘春国; 王寿山; 张超林; 刘彦云; 吕让; 刘明

来源：中国预防兽医学报, 2013, (06): 436-439.

• 禽流感病毒
• H5N1亚型
• HA基因
• 重组腺病毒 avian influenza virus
• H5N1 subtype
• HA gene
• recombinant adenovirus

为构建表达H 5N 1亚型clade 2.3.4禽流感病毒(AIV)HA基因的重组腺病毒,本研究通过RT-PCR扩增A/wild duck/Shandong/628/2011(H 5N 1)的H A基因,克隆于腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,构建重组腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV-HA。采用A d-Easy技术,制备表达AIVHA基因的复制缺陷型重组腺病毒rAd-H A。将rA d-HA感染Ad293细胞,可产生明显的细胞病变。通过细胞超薄切片观察到完整的腺病毒颗粒。经RT-PCR、间接免疫荧光及western blot证明HA基因在A d293细胞中成功转录和表达,并且表达...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 农业部