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摘要
紫花苜蓿(Medicago sativa L.)愈伤组织再生率受基因型限制，是影响苜蓿遗传转化效率的主要因素之一。研究发现，GRF转录因子家族基因在提高多种植物愈伤再生中起着重要促进作用。本试验以拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtGRF序列为模板，在紫花苜蓿基因组序列中查找，获得了含有miR396靶点的9个MsGRFs基因。除MsGRF3a和MsGRF4a外，其余7个MsGRFs在紫花苜蓿胚性愈伤组织中的表达量均显著高于非胚性愈伤。为了进一步研究MsGRFs对紫花苜蓿愈伤再生效率的影响，我们在紫花苜蓿中转入MIM396基因，降低miR396的表达。结果显示：MIM396植株叶片愈伤组织再生时间显著缩短，再生率显著提高；与野生型愈伤组织相比，在MIM396植株叶片诱导的愈伤组织中，除MsGRF3a外，其余MsGRFs显著高表达。以上研究表明，miR396-MsGRF通路对苜蓿愈伤组织再生起着重要调控作用，这为提高苜蓿再生效率，并打破基因型对不同苜蓿品种再生的限制提供候选基因。
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