鸦胆子苦醇阻滞小鼠早期胚胎发育的作用机制

作者：林莹; 孟金花; 姚兵

来源：医学研究生学报, 2017, 30(07): 735-739.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2017.07.012

• 鸦胆子苦醇
• 核因子E2相关因子2
• 早期胚胎
• 细胞周期停滞

目的截止目前,鸦胆子苦醇在小鼠早期胚胎发育中的作用及其作用机制仍不清楚。文中旨在探究鸦胆子苦醇对小鼠早期胚胎发育的影响及其可能的作用通路。方法取100只健康清洁级昆明小鼠(雌鼠80只,雄鼠20只)分为6组:阴性对照组(不添加DMSO)、空白对照组(新鲜CM中培养添加等量DMSO)以及20 nmol/L鸦胆子苦醇组、50 nmol/L鸦胆子苦醇组、100 nmol/L鸦胆子苦醇组、200 nmol/L鸦胆子苦醇组(用CM分别稀释鸦胆子苦醇浓度为20、50、100、200 nmol/L)。每组每次平均使用20枚胚胎,重复4次。受精卵培养24、48、72、96 h分别为2-细胞期、4-细胞期、桑葚胚期和囊胚期。观察各组各期发育率并筛选出最适浓度,并通过免疫荧光染色检测核因子E2相关因子2(Nrf2)的定位,实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别比较G2/M期Cyclin B,CDK1 mRNA水平以及Nrf2蛋白表达的变化。结果在4-细胞期,20、50、100 nmol/L鸦胆子苦醇组胚胎发育率[(75.0±2.8)%、(30.4±7.5)%、(4.2±5.9)%]较阴性对照组[(93.0±2.8)%]、空白对照组[(90.9±1.2)%]显著降低(P<0.05)。在桑葚胚期,与阴性对照组、空白对照组桑葚胚形成率[(83.5±2.1)%、(84.2±1.2)%]比较,50nmol/L鸦胆子苦醇组[(19.3±13.1)%]显著降低[(79.00±0.06)%vs 100%,P<0.05]。50 nmol/L鸦胆子苦醇组Nrf2蛋白的表达较空白对照组显著降低(P<0.05)。50 nmol/L鸦胆子苦醇组G2/M期Cyclin B[(59.5±9.2)%]、CDK1 mRNA[(56.0±1.4)%]的表达较空白对照组(100%)显著降低(P<0.05)。结论鸦胆子苦醇可能通过下调Nrf2,调节Cyclin B-CDK1复合物的表达影响细胞周期由G2向M期转变,进而抑制胚胎发育。

• 单位
  南京军区南京总医院; 南京师范大学; 生命科学学院