摘要
目的:制备抗人DcR3单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性。方法:纯化的His-DcR3融合蛋白免疫小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗人DcR3mAb并进行纯化,纯化后的抗体经Western blot和ELISA方法鉴定其特异性、Ig亚型和效价。结果:获得5株稳定分泌抗DcR3mAb的杂交瘤细胞,均属IgG1亚型,其腹水抗体效价为1×10-5~1×10-7,Western blot显示5株细胞分泌的mAb均可识别DcR3蛋白,其中1株(1B1)可与SW480细胞成分反应。结论:成功建立稳定分泌抗人DcR3mAb的杂交瘤细胞株,其分泌的抗体特异性强、效价高,为研究DcR3在组织中的表达、分布及研制ELISA试剂盒奠定基础。
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单位吉林大学; 吉林省人民医院