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摘要
CRL复合体是泛素蛋白酶体降解系统中的核心酶，很多病毒会劫持宿主CRL复合体，激活或干扰其底物的降解，创造有利病毒复制的环境。本研究为了探讨CRL2复合体和流感病毒之间的关系，利用CRISPR /Cas9技术构建CRL2复合体骨架蛋白Cullin-2基因稳定敲除A549细胞系，并验证Cullin-2基因敲除对流感复制的影响。设计两条靶向Cullin-2的sgRNA，构建到敲除载体中，包装成慢病毒感染细胞，经过药物筛选和亚克隆纯化后，利用蛋白免疫印迹法和敲除位点测序鉴定，并比较野生型和Cullin-2敲除细胞中AIV的复制效率。结果显示，Cullin-2敲除对流感病毒滴度和病毒蛋白水平影响不显著，但会导致细胞因子转录水平的上调，为CRL复合体与流感病毒致病性机制关系研究提供新的思路。
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